ELISA vs WB，怎么選？牢記這幾點
蛋白質分析和鑒定方法***常用的就是ELISA和Western Blot（以下簡稱WB），那到底該選哪種呢？
ELISA簡單，還是WB簡單？
是不是二選***就可以了？
ELISA和WB都是基于抗原-抗體特異性結合的原理，主要區別在于： ELISA對于抗原、抗體都能檢測 WB則主要檢測抗原 此外，了解這兩種方法的優缺點，即可輕而易舉地解決如何選擇的問題。 ELISA 靈敏度高、應用領域廣泛，檢測樣本濃度可低至pg/ml，操作相對簡單，用于確定樣品中是否存在蛋白質的高效方法，亦可精確定量蛋白質的濃度。 ELISA 具有包被、封閉、檢測、 結果讀取4個常規操作步驟，有直接、間接、夾心及競爭檢測4種主要類型。 ELISA直接、間接、夾心檢測示例 ELISA標準曲線示例 ELISA的優缺點 優點：適合體液(血清、尿液等)、細胞上清樣本；靈敏度高，操作簡單、高效、快速（1-2h），需樣品量較少，可以同時進行多個樣本分析。另外，也可靈活地DIY 檢測試劑盒，即可降低成本，又解決了實驗需求；同時ELISA可搭配實驗室高通量或自動化設備，實現自動化操作。 缺點：實驗操作過程中，由于操作問題、樣品污染、使用低質量試劑等原因，其特異性方面經常受到影響，可能會產生假陽性或假陰性結果；此外試劑盒中的抗體組分須低溫運輸、儲存；ELISA無法提供有關目標蛋白的質量和豐度等其他信息。 Western Blot 是***種通過電泳、轉膜、抗體孵育、成像等步驟對目標蛋白進行檢測的方法，操作流程相對復雜，用于識別和了解蛋白質的***些特征元素、蛋白質相互作用和修飾等，可提供目標蛋白的詳細信息，如蛋白質大小和豐度等，也常被用于ELISA和其他檢測方法結果的驗證，它可以有效地幫助排除假陽性或假陰性的結果。 Western Blot的優缺點 優點：適用于組織或細胞裂解液樣本；檢測結果簡單易懂；特異性高，能夠從多種蛋白質中識別目標蛋白；可提供目標蛋白的分子量、表達豐度等信息；熒光Western Blot，可以在***個實驗中進行多重檢測，檢測多種蛋白質。 缺點：傳統操作步驟繁瑣、耗時（1到2天），體系如果沒有優化，容易出現信號衰減快、高背景等情況，導致不理想的檢測結果；同時檢測靶蛋白的數量受限于***抗和二抗的組合；通常被用作驗證方法。 使用iBright 成像系統捕獲的熒光Western Blot圖像示例 那到底怎么選呢，ELISA or Western Blot？ 若實驗目的是需要簡單、快速地確定蛋白質是否存在，并需要得到精確濃度，ELISA是更好的選擇。 若實驗目的是需要得到更多關于蛋白質的信息，比如分子量、純度、蛋白質間相互作用、蛋白質表達變化或翻譯后修飾等，則Western Blot更適合。 此外，Western Blot和ELISA檢測的結果也可相互印證。
(文章來源于儀器網)
